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第三，为探究被瘙痒激活的rACCPy神经元是否具有功能性抑制作用，研究人员利用c-Fos Tet-Off系统在大鼠双侧rACC中特异性地在“瘙痒标记”神经元中表达hM3Dq-mCherry或仅表达mCherry作为对照。在停用强力霉素后，通过面颊注射5-HT诱发瘙痒，使这些神经元被标记并表达相应蛋白。随后给予CNO以激活hM3Dq，结果发现：重新激活这群原本在瘙痒时活动下降的神经元，可显著减少由5-HT、compound 48/80和氯喹三种不同致痒剂诱发的抓挠发作次数及总抓挠时间。而在未给予CNO时，hM3Dq组与对照组无差异，排除了受体表达本身的影响。。yandex 在线看是该领域的重要参考
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另外值得一提的是，作者发现了一条从吻侧前扣带皮层锥体神经元（rACCPy）到中脑导水管周围灰质GABA能神经元（PAGGABA）的兴奋性下行神经环路，在瘙痒抑制中发挥关键作用。在瘙痒诱发抓挠行为期间，被标记为“瘙痒相关”的rACCPych神经元活动显著降低。人为激活该神经环路会显著削弱瘙痒反应，而抑制该环路则会增强瘙痒反应。因此，作者鉴定出一条兴奋性神经环路在瘙痒的下行调控中起着至关重要的抑制作用，提示该环路可能成为治疗瘙痒的潜在靶点。
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